Сучасні підходи до організації невідкладного аналізу в рамках надання допомоги пацієнтам з інфекцією COVID-19

Завдання лабораторної служби при наданні екстреної допомоги пацієнтам з інфекцією COVID-19.

  1. Діагностичне завдання – виявити збудника і верифікувати діагноз.
  2. Протиепідемічне завдання – швидко виявити пацієнтів небезпечних для оточуючих.
  3. Прогностичне завдання - за допомогою лабораторних тестів допомогти лікарю клініцисту виділити групу пацієнтів з потенційно несприятливим прогнозом. 
  4. Моніторинг перебігу захворювання та оцінка ефективності терапії.

Классифікация COVID-19 тестів.

Прямі тести виявлення вірусу SARS-CoV-2 (діагностичні тести):

  • Тести, спрямовані на виявлення РНК вірусу.
  • Тести, спрямовані на виявлення Антигену вірусу.

Непрямі тести, спрямовані на виявлення специфічної відповіді (антитіл) організму на вірус SARS-CoV-2:

  • Тести, засновані на зв'язуванні специфічних антитіл до SARS-CoV-2 з очищеним білком вірусу в реагенте. Факт зв'язування виявляється різними методами (візуально, фотометрія, флуоресценція, хемілюмінісценції).
  • Тести, що оцінюють здатність антитіл в сироватці (плазмі) пацієнта нейтралізувати цитотоксичний ефект вірусу in vitro.

Діагностична завдання - виявити збудника і верифікувати діагноз.

Рання діагностика інфікованих (виявлення вірусу в біологічному матеріалі):

  • виявлення генетичного матеріалу SARS-CoV-2 (ПЛР-аналіз);
  • виявлення антигену вірусу SARS-CoV-2 (методи иммунохімічного аналізу).

Пізня діагностика інфікування, а також оцінка противірусного імунітету:

  • виявлення специфічних антитіл класу IgM і IgG в крові пацієнта.

Протиепідемічне завдання - швидко виявити небезпечних для оточуючих пацієнтів.


Середньостатистична інфікована людина починає виділяти в навколишнє середовище велику кількість вірусу приблизно на 3-й день після зараження [N Engl J Med 382;12 March 19, 2020]. 


Симптоми, якщо вони з'являться, виявляються приблизно на 5-й день зараження. До 8-го дня, незалежно від того, чи з'явилися симптоми чи ні, вірусне навантаження і ступінь контагіозності пацієнта неухильно знижуються [JAMA. 2020;323(15):1488–1494]. 


Загальний висновок: існує приблизно 5-денне вікно максимальної заразності, що тягнеться від 3-го до 8-го дня після інфікування [Nat Med 26, 672–675 (2020)]. 

Тести, засновані на виявленні РНК SARS-CoV-2: діагностична задача.


Завдяки високій специфічності і чутливості є основним тестом діагностики інфекції COVID-19, але ...
  • тривалий час від моменту збору матеріалу до моменту видачі результату інфекції;
  • трудомісткість ПЛР тестування і суворі вимоги до місця виконання, кваліфікації персоналу та необхідність дорогого устаткування;
  • висока ймовірність помилки на кожному з етапів проведення аналізу;
  • висока вартість якісного ПЛР тестування.
обмежують ефективність ПЛР-методів.

Зв'язок результату тесту для виявлення РНК SARS-CoV-2 і контагіозності пацієнта.

  • Тільки третина зразків з позитивними результатами ПЛР викликало зараження клітинної культури.
  • Ступінь інфекційності зразка (здатність заражати вірусом SARS-CoV-2 клітинну культуру) висока при рівні порогового числа циклів Ct<24 циклів. 
  • Контагіозность пацієнтів з вірусним навантаженням Ct>24 - низька. 
  • Імовірність виділення культури вірусу з зразка з Ct> 24 падає на 32% зі збільшенням Ct на кожну одиницю.
    Bullard J, et al. Predicting infectious SARS-CoV-2 from diagnostic samples. Clin Infect Dis. 2020;ciaa 638

Заражений ≠ Заразний 


Поряд з високою чутливістю ПЛР до SARS CoV 2 метод володіє відносно низькою специфічністю до контагіозної стадії захворювання - не всі, у кого виявляється вірус SARS-CoV-2 в дихальних шляхах методом ПЛР, виділяють вірус в достатній кількості, щоб становити небезпеку для інших.

Тести для виявлення антигену
SARS-CoV-2.

  • У зразку мазка з носоглотки, носа, глотки або слини іммунохімічесткі методом детектируются антиген вірусу SARS-CoV-2.
  • В даний час для клінічного застосування валідні тільки тести для виявлення нуклеокапсідного антигену.
  • Час отримання результату 15-30 хвилин.
  • Тести можуть бути без належного обладнання або вимагати POCT-аналізатори для зчитування результату (метод імунофлуоресценції).

Повний текст у версії для скачування.